WO2026119950 - VERFAHREN UND KIT ZUM AMPLIFIZIEREN EINER ZIEL-NUKLEINSÄURESEQUENZ

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Publication Number WO/2026/119950
Publication Date 11.06.2026
International Application No. PCT/EP2025/085217
International Filing Date 03.12.2025
Title **
[German] VERFAHREN UND KIT ZUM AMPLIFIZIEREN EINER ZIEL-NUKLEINSÄURESEQUENZ
[English] METHOD AND KIT FOR AMPLIFYING A TARGET NUCLEIC ACID SEQUENCE
[French] PROCÉDÉ ET KIT D'AMPLIFICATION D'UNE SÉQUENCE D'ACIDE NUCLÉIQUE CIBLE
Applicants **
ROBERT BOSCH GMBH
Inventors
PILSL, Sebastian
GEIER, Alicia
KNAPP, Michael
Priority Data
102024211575.4   04.12.2024   DE
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译文

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Quotation for National Phase entry

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China Filing, Examination, Granting2209
EPO Filing, Examination, Granting8795
Japan Filing, Examination, Granting2154
South Korea Filing, Examination, Granting2066
USA Filing, Examination, Granting4740
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Abstract[German] Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Amplifizieren einer Ziel-Nukleinsäuresequenz aus einem Ausgangsmaterial, das Nukleinsäuren aufweist, das Verfahren umfassend: (a) Bereitstellen eines Reaktionsraums, in dem das Ausgangsmaterial sowie alle Reagenzien für die nachfolgenden Verfahrensschritte (b) bis (e) vorliegen, wobei die Reagenzien eine Mehrzahl von Voramplifikations-Primern (50) und eine Voramplifikations-Polymerase (60) umfassen, wobei die Reagenzien mindestens ein Paar von PCR-Primern (10, 110) und eine PCR-Polymerase (70) umfassen, wobei das Ausgangmaterial zusammen mit den Reagenzien ein Reaktionsgemisch bildet, (b) Erhitzen des Reaktionsgemischs auf 50 bis 85°C, (c) Voramplifizieren der Nukleinsäuren mittels isothermaler Amplifikation unter Verwendung der Voramplifikations-Primer (50) und der Voramplifikations-Polymerase (60), (d) Erhitzen des Reaktionsgemischs auf 90 bis 100°C, (e) Amplifizieren der Ziel-Nukleinsäuresequenz mittels PCR unter Verwendung der PCR-Primer (10, 110) und der PCR-Polymerase (70).[English] The invention relates to a method for amplifying a target nucleic acid sequence from a starting material containing nucleic acids, the method comprising the steps of: (a) providing a reaction chamber in which the starting material and all reagents for the subsequent method steps (b) to (e) are present, wherein the reagents comprise a plurality of preamplification primers (50) and a preamplification polymerase (60), wherein the reagents comprise at least one pair of PCR primers (10, 110) and a PCR polymerase (70), wherein the starting material forms a reaction mixture together with the reagents; (b) heating the reaction mixture to 50 to 85°C; (c) preamplifying the nucleic acids by means of isothermal amplification using the preamplification primers (50) and the preamplification polymerase (60); (d) heating the reaction mixture to 90 to 100°C; (e) amplifying the target nucleic acid sequence by means of PCR using the PCR primers (10, 110) and the PCR polymerase (70).[French] L'invention concerne un procédé d'amplification d'une séquence d'acide nucléique cible à partir d'un matériau de départ contenant des acides nucléiques, le procédé comprenant les étapes consistant à : (a) fournir une chambre de réaction dans laquelle le matériau de départ et tous les réactifs pour les étapes de procédé suivantes (b) à (e) sont présents, les réactifs comprenant une pluralité d'amorces de préamplification (50) et une polymérase de préamplification (60), les réactifs comprenant au moins une paire d'amorces de PCR (10, 110) et une polymérase de PCR (70), le matériau de départ formant un mélange réactionnel conjointement avec les réactifs ; (b) chauffer le mélange réactionnel à 50 à 85 °C ; (c) préamplifier les acides nucléiques au moyen d'une amplification isotherme à l'aide des amorces de préamplification (50) et de la polymérase de préamplification (60) ; (d) chauffer le mélange réactionnel à 90 à 100 °C ; (e) amplifier la séquence d'acide nucléique cible au moyen d'une PCR à l'aide des amorces de PCR (10, 110) et de la polymérase de PCR (70).