IP-Coster | WO2025252784 | VERFAHREN, PRIMER-SET UND KIT ZUM GLEICHZEITIGEN AMPLIFIZIEREN VON EINER MEHR-ZAHL VON ZIEL-NUKLEINSÄURESEQUENZEN IN EINER PROBE

Country	Stages	Total
China	Filing, Examination, Granting	2222
EPO	Filing, Examination, Granting	8643
Japan	Filing, Examination, Granting	2178
South Korea	Filing, Examination, Granting	2075
USA	Filing, Examination, Granting	5940

Abstract[German] Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum gleichzeitigen Amplifizieren von einer Mehrzahl von Ziel-Nukleinsäuresequenzen in einer Probe, das Verfahren umfassend: (S300) Amplifizieren der Ziel-Nukleinsäuresequenzen mittels isothermaler Strangverdrängungs-Amplifikation unter Verwendung von Paaren von flankierten Primern, eines Superprimers (10) sowie von mindestens einem ersten Nicking-Enzym, wobei jeweils ein Paar der flankierten Primer pro zu amplifizierender Ziel-Nuk-leinsäuresequenz verwendet wird und das Paar von flankierten Primern für die zugehörige Ziel-Nukleinsäuresequenz spezifisch ist, wobei jedes Paar von flankierten Primern einen flankierten Vorwärtsprimer und einen flankierten Rückwärtsprimer aufweist, wobei jeder flankierte Vorwärtsprimer an seinem 3'-Ende einen zielspezifischen Abschnitt und an seinem 5'-Ende einen unspezifischen Flankenabschnitt aufweist, wobei der zielspezifische Abschnitt zu einem Abschnitt der zugehörigen Ziel-Nukleinsäuresequenz komplementär ist, wobei jeder flankierte Rückwärtsprimer an seinem 3'-Ende einen zielspezifischen Abschnitt und an seinem 5'-Ende einen unspezifischen Flankenabschnitt aufweist, wobei der zielspezifische Abschnitt zu einem Abschnitt der zugehörigen Ziel-Nukleinsäuresequenz komplementär ist, wobei der Superprimer (10) an seinem 3'-Ende einen Bindungsabschnitt (12) und an seinem 5'-Ende einen Erkennungsabschnitt (14) aufweist, wobei der Erkennungsabschnitt (14) eine Erkennungssequenz für das erste Nicking-Enzym aufweist.[English] The invention relates to a method for simultaneously amplifying a plurality of target nucleic acid sequences in a sample, said method having the step of: (S300) amplifying the target nucleic acid sequences by means of an isothermal strand displacement amplification process using pairs of flanked primers, a superprimer (10), and at least one first nicking enzyme. One pair of flanked primers is used for each target nucleic acid sequence to be amplified, and the pair of flanked primers is specific to the associated target nucleic acid sequence, each pair of flanked primers having a flanked forward primer and a flanked reverse primer; each flanked forward primer has a target-specific portion at the 3' end thereof and a a non-specific flank portion at the 5' end thereof, the target-specific portion being complementary to a portion of the associated target nucleic acid sequence; each flanked reverse primer has a target-specific portion at the 3' end thereof and a non-specific flank portion at the 5' end thereof, said target-specific portion being complementary to a portion of the associated target nucleic acid sequence; and the superprimer (10) has a binding portion (12) at the 3' end thereof and a recognition portion (14) at the 5' end thereof, said recognition portion (14) having a recognition sequence for the first nicking enzyme.[French] L'invention concerne un procédé d'amplification simultanée d'une pluralité de séquences d'acides nucléiques cibles dans un échantillon, ledit procédé comprenant l'étape suivante : (S300) amplification des séquences d'acides nucléiques cibles au moyen d'un processus d'amplification de déplacement de brin isotherme à l'aide de paires d'amorces flanquées, d'une superamorce (10) et d'au moins une première enzyme de coupure. Une paire d'amorces flanquées est utilisée pour chaque séquence d'acide nucléique cible à amplifier et la paire d'amorces flanquées est spécifique à la séquence d'acide nucléique cible associée, chaque paire d'amorces flanquées ayant une amorce sens flanquée et une amorce antisens flanquée ; chaque amorce avant flanquée a une partie spécifique à une cible à son extrémité 3' et une partie de flanc non spécifique à son extrémité 5', la partie spécifique à une cible étant complémentaire d'une partie de la séquence d'acide nucléique cible associée ; chaque amorce antisens flanquée a une partie spécifique à une cible à son extrémité 3' et une partie flanc non spécifique à son extrémité 5', ladite partie spécifique à une cible étant complémentaire d'une partie de la séquence d'acide nucléique cible associée ; et la superamorce (10) a une partie de liaison (12) à son extrémité 3' et une partie de reconnaissance (14) à son extrémité 5', ladite partie de reconnaissance (14) ayant une séquence de reconnaissance pour la première enzyme de coupure.

Total Number of Claims/PCT	*
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Type of Assignment	The Standard Agent's Assignment *
Applicant's Legal Status	Legal Entity *
Small Entity	*
Non-Commercial Organization	*
Micro Entity	*
Small Entity, USA	*
Micro Entity, USA	*
Entry into National Phase under	Chapter I *
Patent Delivery	Send the Letters Patent by Courier *
Translation

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