WO2025201361 - METHOD FOR RAPID CONSTRUCTION OF KIDNEY ORGANOIDS AND USE THEREOF

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Publication Number WO/2025/201361
Publication Date 02.10.2025
International Application No. PCT/CN2025/084852
International Filing Date 26.03.2025
Title **
[English] METHOD FOR RAPID CONSTRUCTION OF KIDNEY ORGANOIDS AND USE THEREOF
[French] PROCÉDÉ DE CONSTRUCTION RAPIDE D'ORGANOÏDES RÉNAUX ET UTILISATION ASSOCIÉE
[Chinese] 一种快速构建肾类器官的方法及其应用
Applicants **
MILECELL BIOLOGICAL SCIENCE & TECHNOLOGY CO., LTD.
Inventors
WANG, Jingwen
ZHOU, Li
DUAN, Namin
XIE, Xiaoqing
HUANG, Binlu
Priority Data
202410372736.5   29.03.2024   CN
Application details
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EPO Filing, Examination, Granting11624
Japan Filing, Examination, Granting2015
South Korea Filing, Examination, Granting1789
USA Filing, Examination, Granting4740
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Abstract[English] Provided are a method for rapid construction of kidney organoids, and the use thereof. The method comprises: (1) directly inoculating human induced pluripotent stem cells, or aggregating said cells into spheroids and then inoculating same, and culturing the human induced pluripotent stem cells by using a culture medium containing an inhibition component, the inhibition component containing a GSK-3 inhibitor; (2) by means of using an additive-free basic culture medium or a culture medium containing FGF-9, culturing the cells obtained in step (1); (3) by means of using a culture medium containing a GSK-3 inhibitor and FGF-9, culturing the cells obtained in step (2); (4) by means of using a culture medium containing FGF-9, culturing the cells obtained in step (3); and (5) by means of using the additive-free basic culture medium, culturing the cells obtained in step (4). Compared with existing reported differentiation schemes, the present method can shorten the construction time of kidney organoids to 6-8 days, and can be directly applied to in-vitro toxicological tests, thereby achieving an extremely high practical value.[French] L'invention concerne un procédé de construction rapide d'organoïdes rénaux, ainsi qu'une utilisation associée. Le procédé consiste en : (1) l'inoculation directe de cellules souches pluripotentes induites humaines ou l'agrégation desdites cellules en sphéroïdes, puis l'inoculation de celles-ci, ainsi qu'en la culture des cellules souches pluripotentes induites humaines à l'aide d'un milieu de culture contenant un composant d'inhibition, le composant d'inhibition contenant un inhibiteur de GSK-3 ; (2) la culture, en utilisant un milieu de culture basique sans additif ou un milieu de culture contenant du FGF-9, des cellules obtenues à l'étape (1) ; (3) la culture, au moyen d'un milieu de culture contenant un inhibiteur de GSK-3 et du FGF-9, des cellules obtenues à l'étape (2) ; (4) la culture, au moyen d'un milieu de culture contenant du FGF-9, des cellules obtenues à l'étape (3) ; et (5) la culture, au moyen du milieu de culture basique sans additif, des cellules obtenues à l'étape (4). Par comparaison avec des schémas de différenciation rapportés existants, le présent procédé peut raccourcir le temps de construction d'organoïdes rénaux de 6-8 jours et peut être directement appliqué à des tests toxicologiques in vitro, ce qui permet d'obtenir une valeur pratique extrêmement élevée.[Chinese] 提供了一种快速构建肾类器官的方法及其应用。所述方法包括(1)将人诱导多能干细胞以直接接种,或,聚集成球后再接种的方式,用含有抑制组分的培养基进行培养;所述抑制组分含有GSK-3抑制剂;(2)将步骤(1)获得的细胞用无添加基础培养基或含有FGF-9的培养基进行培养;(3)将步骤(2)获得的细胞用含有GSK-3抑制剂和FGF-9的培养基进行培养;(4)将步骤(3)获得的细胞用含有FGF-9的培养基进行培养;(5)将步骤(4)获得的细胞用无添加基础培养基进行培养。相较于现有报道的分化方案,该方法能够将肾脏类器官的构建时间缩短至6~8天,且可以直接应用于体外毒理性实验,具有极高的实用价值。

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