WO2026025571 - EXPRESSION VECTOR FOR RSPO1 PROTEIN AND USE THEREOF
National phase entry is expected:
Publication Number
WO/2026/025571
Publication Date
05.02.2026
International Application No.
PCT/CN2024/114483
International Filing Date
26.08.2024
Title **
[English]
EXPRESSION VECTOR FOR RSPO1 PROTEIN AND USE THEREOF
[French]
VECTEUR D'EXPRESSION POUR PROTÉINE RSPO1 ET SON UTILISATION
[Chinese]
一种RSPO1蛋白的表达载体及其应用
Applicants **
SHANGHAI OPM BIOSCIENCES CO., LTD.
Inventors
DING, Yue
LOU, Wenjuan
HUANG, Yifan
XIAO, Zhihua
Priority Data
202411017335.4
29.07.2024
CN
Application details
| Total Number of Claims/PCT | * |
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International Searching Authority |
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| Type of Assignment |
The Standard Agent's Assignment
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| Applicant's Legal Status |
Legal Entity
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| Entry into National Phase under |
Chapter I
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| Patent Delivery |
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Quotation for National Phase entry
| Country | Stages | Total | |
|---|---|---|---|
| China | Filing, Examination, Granting | 1574 | |
| EPO | Filing, Examination, Granting | 11600 | |
| Japan | Filing, Examination, Granting | 2025 | |
| South Korea | Filing, Examination, Granting | 1783 | |
| USA | Filing, Examination, Granting | 4740 |
Total:
21,722
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Abstract[English]
The present invention belongs to the field of biology, and relates to a vector for expressing an RSPO1 protein and the use thereof. A plasmid containing a strong cell expression promoter is constructed, a 293 cell line with efficient and stable expression is obtained by means of screening, and a downstream purification process is optimized, thereby achieving mass production of an RSPO1 recombinant protein. The obtained 293 cell line with stable expression can be cultured in suspension in a serum-free medium for growth and cytokine expression and production, thus eliminating the influence of components in serum on the product quality. Moreover, the production volume can be scaled up to 2 L, 10 L or even 300 L, eradicating the limitations of the small volume of a plate culture system. In addition, the operations of plasmid extraction and transfection are omitted from production, which can reduce the batch-to-batch variation in cytokine expression, laying a foundation for large-scale expression.[French]
La présente invention appartient au domaine de la biologie, et concerne un vecteur pour exprimer une protéine RSPO1 et son utilisation. Nous avons construit un plasmide contenant un promoteur d'expression cellulaire puissant, obtenu une lignée cellulaire 293 présentant une expression efficace et stable grâce à un criblage, et optimisé un processus de purification en aval, ce qui nous a permis de produire en masse une protéine recombinée RSPO1. La lignée cellulaire à expression stable 293 obtenue peut être cultivée en suspension dans un milieu sans sérum pour la croissance et l'expression et la production de cytokines, éliminant ainsi l'influence des composants du sérum sur la qualité du produit. De plus, le volume de production peut être augmenté jusqu'à 2 L, 10 L ou même 300 L, ce qui élimine les contraintes liées au faible volume d'un système de culture sur plaque. De plus, les opérations d'extraction et de transfection des plasmides sont supprimées du processus de production, ce qui permet de réduire les variations d'expression des cytokines d'un lot à l'autre et jette les bases d'une expression à grande échelle.[Chinese]
涉及一种RSPO1蛋白的表达载体及其应用，属于生物领域。构建了一种含有细胞表达强启动子的质粒，通过筛选获得高效、稳定表达293细胞株，同时优化下游纯化工艺，从而实现Rspo1重组蛋白的量产。得到的293稳转表达细胞系可以在无血清培养基中悬浮培养生长表达生产细胞因子，消除血清中成分对产品平直的影响。同时，生产体积可以放大到2L，10L、甚至300L，破除了孔板培养体系小的局限。另外，生产中省去质粒抽提和转染的操作，可以降低因子表达的批间差异，为大量表达提供了基础。