WO2025217892 - GENE EDITING METHOD FOR SIMULTANEOUS KNOCK-IN OF DNA FRAGMENTS AT MULTIPLE SITES AND APPLICATION THEREOF
National phase entry is expected:
Publication Number
WO/2025/217892
Publication Date
23.10.2025
International Application No.
PCT/CN2024/088713
International Filing Date
19.04.2024
Title **
[English]
GENE EDITING METHOD FOR SIMULTANEOUS KNOCK-IN OF DNA FRAGMENTS AT MULTIPLE SITES AND APPLICATION THEREOF
[French]
PROCÉDÉ D'ÉDITION GÉNIQUE POUR LE KNOCK-IN SIMULTANÉE DE FRAGMENTS D'ADN AU NIVEAU DE PLUSIEURS SITES ET APPLICATION ASSOCIÉE
[Chinese]
多位点同时敲入DNA片段的基因编辑方法及其应用
Applicants **
SHENZHEN CELCONTA LIFE SCIENCE CO., LTD.
Inventors
MA, Liya
XIE, Haitao
LIU, Dong
Application details
| Total Number of Claims/PCT | * |
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International Searching Authority |
CNIPA
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Change of Applicant's Name and Address
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| Type of Assignment |
The Standard Agent's Assignment
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| Applicant's Legal Status |
Legal Entity
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| Entry into National Phase under |
Chapter I
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| Patent Delivery |
Send the Letters Patent by Courier
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Quotation for National Phase entry
| Country | Stages | Total | |
|---|---|---|---|
| China | Filing, Examination, Granting | 2035 | |
| EPO | Filing, Examination, Granting | 14354 | |
| Japan | Filing, Examination, Granting | 2264 | |
| South Korea | Filing, Examination, Granting | 2211 | |
| USA | Filing, Examination, Granting | 4740 |
Total:
25,604
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Abstract[English]
Provided are a gene editing method for the simultaneous knock-in of DNA fragments at multiple sites and an application thereof. The method comprises the following steps: making a plurality of double-stranded DNA nicks in a target gene; designing a plurality of homology-directed repair templates; designing exogenous DNA fragments on the homology-directed repair templates; constructing the plurality of homology-directed repair (HDR) templates on the same vector in series; and respectively enabling knock-in of the exogenous DNA fragments into the double-stranded DNA nicks by means of the vector. The multi-site multi-fragment gene knock-in provided by this gene editing method can bring a plurality of DNA fragments into a single vector by means of HDR and enable simultaneous and precise insertion of a plurality of exogenous genes into a target genome at distinct sites, thereby greatly reducing gene editing costs and also increasing the editing efficiency. The gene editing method can be used for basic research and clinical application research.[French]
L'invention concerne un procédé d'édition génique permettant le knock-in simultané de fragments d'ADN au niveau de plusieurs sites, et une application associée. Le procédé comporte les étapes suivantes : réalisation d'une pluralité de coupures d'ADN double brin dans un gène cible ; conception d'une pluralité de matrices de réparation dirigée par homologie ; conception de fragments d'ADN exogènes sur les matrices de réparation dirigée par homologie ; construction de la pluralité de matrices de réparation dirigée par homologie (HDR) sur le même vecteur en série ; et permettre respectivement le knock-in des fragments d'ADN exogènes dans les coupures d'ADN double brin au moyen du vecteur. Le knock-in génique multi-site et multi-fragments apporté par cette méthode d'édition génique permet d'introduire plusieurs fragments d'ADN dans un seul vecteur au moyen de HDR et d'insérer simultanément et précisément plusieurs gènes exogènes dans un génome cible au niveau de sites distincts, ce qui réduit considérablement les coûts d'édition génique et augmente également l'efficacité de l'édition. Le procédé d'édition génique peut être utilisé pour la recherche fondamentale et la recherche clinique appliquée.[Chinese]
提供了一种多位点同时敲入DNA片段的基因编辑方法及其应用，该方法包括步骤：在目的基因中制造多个双链DNA切口；设计多个同源介导修复模板；在同源介导修复模板上设计外源DNA片段；将多个同源介导修复模板以串联方式构建在同一个载体上；通过载体分别将外源DNA片段敲入各双链DNA切口。这种基因编辑方法，提供的多位点、多片段基因敲入，可将多个DNA片段通过HDR的方式采用一个载体，将外源基因同时准确插入到目的基因组的不同位点，大大降低了基因编辑成本，也增加了编辑效率，并可用于基础研究和临床应用研究。